HK-2人腎近曲小管上皮細(xì)胞

屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞，通過導(dǎo)入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-2；Psi-2細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA317，zui后將PA317細(xì)胞產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示，HK-2細(xì)胞來源于單克隆。PCR檢測(cè)證實(shí)，HK-2細(xì)胞基因組中含有E6/E7基因。

種屬：人

年齡（性別）：男；16歲
組織來源：外周血；B淋巴母細(xì)胞；Burkitt's淋巴瘤
生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣 
生長(zhǎng)培養(yǎng)基
RPMI-1640(貨號(hào):PM150110)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃

說明

規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi)包裝：內(nèi)層無菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；
說明書細(xì)胞來源：ATCC、sciencell、ICLC
貨期：1-2周
運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸
售后：收到細(xì)胞后12天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售人員，我們將盡快為您解決！上海雅吉生物與您攜手共進(jìn)！以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)或郵件。需要特別指出的是：如細(xì)胞出現(xiàn)問題，請(qǐng)于48h內(nèi)及時(shí)反饋，本公司將竭誠(chéng)為您服務(wù)！

HK-2人腎近曲小管上皮細(xì)胞
一．貼壁細(xì)胞 客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2 培養(yǎng)。 Hela人宮頸癌細(xì)胞
二．懸浮細(xì)胞
 1. 接收到，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
三．一毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細(xì)胞。
 1. 用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）
2. 嚴(yán)格無菌操作，用吸管吸出管中細(xì)胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。
 4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO7 培養(yǎng)。